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IBA BioTAGnology


Strep-tag® / Strep-Tactin®蛋白质表达与纯化系统

 

Strep column00

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strep column02

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strep column05


图片(从左至右):1、GFP-Strep-tag II融合蛋白特异结合在Strep-Tactin SepharoseÒ柱上,而非特异性蛋白质被少量生理性洗涤缓冲液迅速洗去。2、由于加入特异性竞争剂脱硫生物素,Strep-tag蛋白被洗脱。3-5、柱再生:脱硫生物素被黄色溶液HABA取代,后者一旦与Strep-Tactin复合即变为红色。HABA随后被洗涤缓冲液除去,柱子可被重新使用。

 



怎样获得优良无比的纯化因素  

  Strep-tag® 纯化系统是基于Strep-tag II肽和特殊设计的Strep-Tactin(streptavidin的变体)之间高选择性和极易控制的相互作用而建立起来的蛋白纯化系统。Strep-tag IIStrep-Tactin的结合亲和力比对streptavidin高将近100。在亲和纯化过程中,附了tag的蛋白质结合在被固定了的Strep-Tactin上。生理缓冲液如PBS可与一系列添加剂一起用于该纯化过程。短暂的洗涤步骤之后,在同一缓冲液中加入脱硫生物素(2.5 mM)即可将纯化的重组蛋白温和地洗脱下来。脱硫生物素是一种便宜的、可逆结合的、稳定的生物素类似物,而生物素是streptavidin的天然配体。这种竞争性洗脱是赋予特异性的第二步,从而得到优良无比的纯化因素。该系统安全、易于使用;纯化柱再生和活性状态可以通过纯化柱上的颜色改变来观察到。

 

  Strep-tag融合蛋白可以经Western blots, ELISA, 电子或荧光显微镜进行方便的检测。有相应的Strep-Tactin酶共轭物和抗Strep-tag II的单克隆抗体供出售。

 

Strep-tag®II对蛋白质的影响可以忽略

  此8个氨基酸的短肽tag由于具有化学平衡的氨基酸组成(WSHPQFEK),因此对重组蛋白的影响可以忽略不计。该tag可以被置于C-端或N-端。建议在蛋白和tag之间加入2个氨基酸的间隔以确保tag的可接近性。总的来说,该tag不干扰蛋白质的折叠或生物活性、不与重金属离子缓冲液杂质反应、无离子交换属性、不会诱导蛋白质聚集。因此无需去除该tag。

 

Strep-Tactin®:长效的亲和柱

  Strep-Tactin是streptavidin的一种衍生物,是已知最稳定的蛋白质之一。Streptavidin对以8 M urea或guanidine, 0.5 M NaOH以及50 % formamide (t = 1 h; T = 37 °C)的处理保持稳定。蛋白酶(胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、嗜热菌蛋白酶和弹性蛋白酶等) 在1:50 w/w比例下,37 °C孵育2小时都无法切割 streptavidin。当SDS存在时,仅在温度高于60 °C时,streptavidin才开始降解成单体。经过测试,Strep-Tactin已经被证实具有上述作为长效亲和柱必备的卓越特性,可被重复使用3-5次。而且,Strep-Tactin的中性PI值使非特异性蛋白质或核酸的结合降到最低。

 

Strep-Tactin树脂技术指标

 


  有5种版本Strep-Tactin树脂,区别在于其特性和应用。Strep-Tactin Sepharose®优先用于重力流层析;Strep-Tactin Superflow®和Strep-Tactin MacroPrep® 也可用于低压力或FPLC;Strep-Tactin POROS® (20和50)用于FPLC和HPLC层析。每个基质都会表现出不同的非特异性结合性质,当使用某种基质由于非特异性背景而无法获得满意结果时,建议换用其它的基质(亦请见Strep-Tactin Column Evaluation Sets)。此外Superflow尤其适用于增加的流速,也适用于大的蛋白质复合物的纯化。 
请注意,Strep-Tactin树脂被优化用于柱亲和层析,而不适用于批量纯化。批量纯化请使用IBA的MagStrep Strep-Tactin包被的磁珠。 


表1: 与Strep-tag/Strep-Tactin相互作用兼容的试剂 


试剂

浓度

Reduction Agents

DTT

50 mM

β-mercaptoethanol

50 mM

Non-Ionic Detergents

C8E4 Octyltetraoxyethylene

最高0.88 %

C10E5; Decylpentaoxyethylene

0.12 %

C10 E6

0.03 %

C12 E8

0.005 %

C12E9; Dodecyl nonaoxyethylene (Thesit)

0.023 %

DM; Decyl-β-D-maltoside

0.35 %

LM; N-dodecyl β-D-maltoside

0.007 %

NG; N-nonyl-β-D-glucopyranoside

0.2 %

OG; N-octyl-β-D-glucopyranoside

2.34 %

TX; Triton X-100

2 %

Tween 20

2 %

Ionic Detergents

N-lauryl-sarcosine 2 %
8-HESO;N-octyl-2-hydroxy-ethylsulfoxide 1,32 %
SDS; Sodium-N-dodecyl sulfate 0.1 %

Zwitter-Ionic Detergents

CHAPS 0.1 %
DDAO; N-decyl-N,N-dimethylamine-N-oxide 0.034 %
LDAO; N-dodecyl-N,N-dimethylamine-N-oxide 0.13 %

其它

Ammonium sulfate (NH4)2SO4

2 M

CaCl2

最高1 M
Ethanol 10%
EDTA 50 mM
Guanidine 最高1 M
Glycerol 最高25 %
Imidazole 最高250 mM

MgCl2

1 M
NaCl 5 M
Urea 最高1 M


注意:这些试剂在高达上述浓度下已成功用于纯化如GAPDH-Strep-tagÒ。未标注“最高”的试剂,也许可以使用更高浓度。由于结合依赖于Strep-tag在特殊蛋白质中的空间可及性,所给的浓度值对于其他蛋白质可能有偏差。

 

 

  Strep-Tactin Sepharose提供高结合容量和最低的非特异结合(见下图),可用于重力流纯化。由于Strep-Tactin树脂经过优化适于柱亲和层析,而不适于批量纯化,因此推荐使用预装的Strep-Tactin Sepharose柱。该纯化柱有多种形式,从0.2 ml迷你柱到10 ml柱。

 



Strep-Tactin Sepharose树脂技术指标:


Strep-Tactin浓度: 5 mg/ml 沉积树脂
结合容量: 1 ml沉积树脂可一步法纯化50-100 nmol 重组蛋白(多达3 mg 30 KDa蛋白质)
支持介质: Sepharose 4FF, 4 % agarose
珠子大小 45 - 165 µm
线性流动速率: 重力流
排阻极限: 3 x 107 Da
形式: 50 % 悬浮在100 mM Tris/HCl pH 8.0, 1 mM EDTA, 150 mM NaCl
稳定性: 室温运输后能保存至少6个月
保存: 4 °C,不能冻存
运输: 室温


 

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2-1202-550

重力流Strep-Tactin Sepharose迷你柱(0.2 ml柱床体积)

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IBA

2-1202-001

重力流Strep-Tactin Sepharose柱(1 ml柱床体积)

1 柱

IBA

2-1202-050

5 柱

IBA

2-1202-051

重力流Strep-Tactin Sepharose柱(5 ml柱床体积)

1 柱

IBA

2-1202-101

重力流Strep-Tactin Sepharose柱(10 ml柱床体积)

1 柱

IBA

2-1201-002

Strep-Tactin Sepharose (50 %悬浮)

4 ml

IBA

2-1201-010

20 ml

IBA

2-1201-025

50 ml

IBA

2-1201-100

200 ml

IBA

2-1201-500

1000 ml

IBA


 

 

Strep-Tactin® Superflow®

 


  Strep-Tactin Superflow具有超强的机械稳定性、卓越的流动特性以及高动态结合容量,可以用于重力流和FPLC,适用于增加的流动速率及纯化大的蛋白复合物(见下图特殊用途)。 
由于Strep-Tactin树脂经过优化适合柱亲和纯化而不适于批量纯化,因此推荐使用预填装的Strep-Tactin Superflow柱。柱具有多种规格(从0.2 ml迷你柱至10 ml柱),是为重力流而设计。若为更方便的用途如FPLC所用,Strep-Tactin Superflow尚有预填装的cartridges。


 

Strep-Tactin Superflow树脂技术指标:


结合容量: 1 ml沉积树脂(对应于2 ml 50 % 悬浮液)可用以一步纯化50-100 nmol重组蛋白(高达3 mg 30 kDa蛋白质)
支持介质: Superflow 6 (6 % agarose,交联)
珠子大小: 60-160 µm,球形
线性流动速率: 推荐100-300 cm/h用于纯化Strep-tag蛋白

形式(bulk)

50 % 悬浮在100 mM Tris/HCl pH 8.0, 150 mM NaCl, 1 mM EDTA
稳定性: 室温运输后可以保存6个月
保存: 4°C,不能冻存
运输: 室温


 

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2-1207-550 重力流Strep-Tactin Superflow迷你柱(0.2 ml柱床体积)

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IBA

2-1207-001 重力流Strep-Tactin Superflow柱(1 ml柱床体积)

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IBA

2-1207-050

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IBA

2-1211-001 Strep-Tactin Superflow cartridge(1 ml柱床体积)

1 cartridge

IBA

2-1211-050 Strep-Tactin Superflow cartridge(1 ml柱床体积)

5 cartridges

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2-1212-001 Strep-Tactin Superflow cartridge(5 ml柱床体积)

1 cartridge

IBA

2-1212-050 Strep-Tactin Superflow cartridge(5 ml柱床体积)

5 cartridges

IBA

2-1206-002 Strep-Tactin Superflow (50 % suspension)

4 ml

IBA

2-1206-010

20 ml

IBA

2-1206-025

50 ml

IBA

2-1206-100

200 ml

IBA

2-1206-500

1000 ml

IBA


 

Strep-Tactin® MacroPrep®

 

  Strep-Tactin MacroPrep适合所有低压力层析应用。MacroPrep树脂展现与Sepharose®或Superflow®不同的非特异结合性质,因此当采用Sepharose®或Superflow®无法获得优化结果时,推荐使用MacroPrep树脂,反之亦然(见下图)。由于Strep-tag纯化系统是为柱亲和层析而非批量纯化而设计,因此推荐使用我们预装的Strep-Tactin MacroPrep装置用于柱层析。

  重力流柱具有多种规格,柱床体积分别为0.2 ml、1 ml、5 ml和10 ml,使用时无需任何进一步的特殊设备。Strep-Tactin MacroPrepcartridges是预填装的即用型层析柱,可以方便地与注射器、蠕动泵层析系统或FPLC / HPLC工作站一起使用,以在低压力条件下快速、全自动的纯化Strep-tag融合蛋白。

  Strep-Tactin MacroPrep cartridges有1 ml和5 ml并且可以串联以扩大吸附容量。IBA也供应螺纹入口和出口的接头。1 ml Strep-Tactin MacroPrepcartridges的平均吸附容量是每次50-100 nmol重组Strep-tag融合蛋白,推荐的流动速率为1 ml / minute (大约相当于使用注射器时每分钟20滴)。

 

Strep-Tactin MacroPrep树脂技术指标:

结合容量: 1 ml沉积树脂(相当于2 ml 50 % 的悬浮液) 可用于一步纯化50-100 nmol重组蛋白
支持介质: MacroPrep® 50 (polymethacrylate)
珠子大小: 50 µm
线性流动速率: 高达300 cm/h可用于Strep-tag纯化
形式(bulk): 50 % suspension in 100 mM Tris/HCl pH 8.0, 1mM EDTA, 150 mM NaCl
稳定性: 运输后可以保存6个月
保存: 4 °C,不能冻存
运输: 室温

 

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2-1506-550 重力流Strep-Tactin MacroPrep迷你柱(0.2 ml柱床体积)

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IBA

2-1506-001 重力流Strep-Tactin MacroPrep柱(1 ml柱床体积)

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IBA

2-1506-050

5柱

IBA

2-1506-051 重力流Strep-Tactin MacroPrep柱(5 ml柱床体积)

1柱

IBA

2-1506-101 重力流Strep-Tactin MacroPrep柱(10 ml柱床体积)

1柱

IBA

2-1511-001 Strep-Tactin MacroPrep Cartridge(1 ml柱床体积)

1 cartridge

IBA

2-1511-050

5 cartridges

IBA

2-1512-001 Strep-Tactin MacroPrep Cartridge(5 ml柱床体积)

1 cartridge

IBA

2-1512-050

5 cartridges

IBA

2-1505-002 Strep-Tactin MacroPrep (50 %悬浮)

4 ml

IBA

2-1505-010

20 ml

IBA

2-1505-025

50 ml

IBA

2-1505-100

200 ml

IBA

2-1505-500

1000 ml

IBA



 

Strep-Tactin® POROS®

 

  Strep-Tactin POROS优化组合了高流动速率、高选择性结合和高动态容量(见下图),可用于FPLC或HPLC以快速纯化Strep-tag蛋白。Strep-Tactin POROS 20的珠子大小为20 µm,而POROS 50的珠子大小为50 µm,但其结合容量相同。由于Strep-Tactin树脂经过优化适合柱亲和纯化,而不适于批量纯化,因此推荐使用预装的1.7 ml的Strep-Tactin POROS柱用于FPLC和HPLC。请注意:POROS 的结合容量只有Strep-Tactin Sepharose、Superflow和MacroPrep的一半左右;POROS不被推荐用于膜蛋白纯化。

 

Strep-Tactin POROS树脂技术指标:

 

结合容量: 1.7 ml柱可用于一步法纯化40-80 nmol重组蛋白
支持介质: POROS 20或POROS 50
珠子大小 20 µm或50 µm
线性流动速率: 300 - 500 cm/h可用于 Strep-tag纯化
形式 (bulk) 50 % 悬浮在100 mM Tris/HCl pH 8.0, 1mM EDTA, 150 mM NaCl
稳定性: 运输后至少6个月
保存: 4 °C,不能冻存
运输: 室温

 

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目录号 产品说明

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2-1203-017 即用型Strep-Tactin POROS 20柱(1.7 ml柱床体积)

1 柱

IBA

2-1205-017 即用型Strep-Tactin POROS 50柱(1.7 ml柱床体积)

1 柱

IBA

2-1203-001 Strep-Tactin POROS 20 (50 %悬浮)

2 ml

IBA

2-1203-002

4 ml

IBA

2-1203-005

10 ml

IBA

2-1203-010

20 ml

IBA

2-1205-001 Strep-Tactin POROS 50 (50%悬浮)

2 ml

IBA

2-1205-002

4 ml

IBA

2-1205-005

10 ml

IBA

2-1205-010

20 ml

IBA

 

Strep-Tactinâ 离心柱(Spin Columns)——用于快速平行纯化Strep-tagâ蛋白

 

l     10分钟之内纯化多达150 ug Strep-tag蛋白

l     即用型离心柱

l     快速平行处理多个样本

l     非常合算

 

  为了快速、易于操作的蛋白质平行纯化,IBA提供多用途的Strep-Tactin 离心柱以填补Strep-Tactin重力流柱与以96孔形式高通量纯化的Strep-Well HT纯化微孔板之间的空缺。

 


Strep-Tactin 离心柱技术指标

产品说明: 即用型带有固定好的Strep-Tactin的离心柱,用于从小规模表达培养物中快速纯化Strep-tag蛋白
形式(柱): 50个预填装离心柱和接收管。用前需以Buffer W (100 mM Tris / HCl pH8.0, 1 mM EDTA, 150 mM NaCl) 将离心柱重新水化和激活。
结合容量: 多达150 ug Strep-tag II融合蛋白
稳定性: 运输后6个月
贮存: 4°C
运输: 室温

 

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规格

供应商

2-1800-000 Strep-Tactin Spin Column kit

1 kit

IBA

2-1850-050 Strep-Tactin Spin Columns

50 columns

IBA

Strep-Tactin Spin Column kit包含50个spin柱,收集管,洗涤缓冲液,洗脱缓冲液和对照质粒。

 

表达载体

 

Tet和T7表达系统

 


Tet表达系统

 

特点和优点:

  • 以pASK-IBA载体在大肠杆菌中高水平表达
  • 由于tet启动子而使表达受到紧密调控
  • 增加细胞毒性基因的稳定性
  • 通用的克隆策略,只需一个限制性内切酶
  • N-端或C-端Strep-tag II融合
  • N-端或C-端6xHistidine-tag融合
  • Strep-tag II/6xHistidine-tag双标记载体
  • 胞液或外周胞质中表达
  • 无水四环素(anhydrotetracycline,AHT)诱导表达
  • 氨卞青霉素或氯霉素抗性

 

原理和特性

  pASK-IBA载体与受紧密调控的tet启动子一起工作。tet抑制子在pASK-IBA质粒上编码,并分别从beta-内酰胺酶启动子或氯霉素乙酰基转移酶启动子组成型表达。这种特殊的安排保证了抑制分子和质粒拷贝数之间平衡的化学计量。在低浓度无水四环素的有效化学诱导下,外源基因表达受到的严格抑制才得以解除。与lac启动子(有漏洞、易受分解代谢产物(cAMP水平,代谢状态)的抑制以及受染色体编码的抑制分子的影响)相比,tetA启动子/操纵子受到紧密调控,不与任何细胞调节机制或遗传背景有功能上的偶联。

  因此,无需特殊大肠杆菌菌株或额外质粒,多种培养基和培养条件下都可以应用。例如,葡萄糖基础培养基甚至XL 1-Blue菌株(携带四环素抗性基因的一个附加拷贝),也可用于表达。pASK-IBA表达系统在发酵等多种条件下非常稳定,操作方便。

  细胞质pASK-IBA载体现以“plus”版本提供。这种新版本包含改良的翻译起始位点以增加一级蛋白质产量,而“plus”载体(如pASK-IBA3plus)的其余序列与其“非plus”前体(如pASK-IBA3)相同。“非plus”版载体从现在开始仅按需供应。

  载体的更多元件包括一个前后串联的核糖体结合位点(RBS),保证翻译的有效起始;脂蛋白基因的强终止子,以避免通读;噬菌体f1的基因间区域,以提供一种制备单链DNA的方法;以及一个beta-内酰胺酶或氯霉素乙酰基转移酶基因*。这些载体均不介导抗四环素抗性。

 

*使用带beta-内酰胺酶抗性基因的克隆载体可能会有某些局限性,因为氨苄青霉素在细菌培养基里降解的相当快。因此,我们现在以氯霉素抗性取代氨苄青霉素抗性供应Strep-tag II载体pASK-IBA2C至pASK-IBA7C。

 


参考文献:
Skerra, A. (1994). Use of the tetracycline promoter for the tightly regulated production of a murine antibody fragment in Escherichia coli. Gene, 151, 131-135.


 

  以下大肠杆菌菌株已与pASK-IBA载体一起成功用于Tet表达:JM83, WK6, B, BL21, MG1655, W3110, BL21(DE3), BLR(DE3), XL1-Blue, BL21-CodonPlusTM-RIL

  对于分泌型蛋白,我们推荐JM83。对于胞质表达我们推荐大肠杆菌B菌株,因为它们缺乏离子蛋白酶和ompT外膜蛋白酶,后两者能在纯化过程中降解蛋白质(Grodberg and Dunn, 1988, J.Bacteriol. 170, 1245)。

请注意我们不知道有与Tet表达系统不兼容的大肠杆菌菌株。

 

无水四环素:tetA启动子诱导剂

  Strep-tag/Strep-Tactin 过度表达系统的大肠杆菌表达框受tetA启动子/操纵子和抑制子的转录调控。启动子被低浓度无水四环素(AHT)诱导,既节省费用也使AHT的抗菌影响降到最低。Degenkolb 等 (1991) 研究表明,AHT 对tet抑制子的结合比四环素对tet抑制子的结合紧密35倍。


参考文献:
Degenkolb J, Takahashi M, Ellestad GA, Hillen W, 1991:Antimicrob. Agents Chemother. 35, No 8, 1591-1595 Structural requirements of tetracycline-Tet repressor interaction: Determination of equilibrium binding constants for tetracycline analogues with the Tet repressor.


 

T7表达系统

 

特点和优点:

  • 以pPR-IBA载体通过噬菌体T7启动子高水平表达
  • 在BL21菌株中,在T7 RNA polymerase作用下高水平转录
  • 无毒蛋白高水平表达
  • IPTG诱导
  • N-端或C-端导入Strep-tag II标签
  • 适合体外转录和翻译

原理和特性:

 

  Tet启动子具有中等强度,可以导致某些蛋白质的高水平表达(取决于如折叠速度和稳定性等难以预测的特性)。但是有些蛋白质只有经强启动子的转录才能高水平表达。在这些情况下我们推荐使用T7启动子。

  T7表达系统在pPR-IBA载体上编码,该系统采用T7启动子和T7 RNA聚合酶以使目标基因高水平转录。目标基因的表达受到宿主细胞中T7 RNA 聚合酶的诱导。这一点可以通过使用大肠杆菌BL21来实现。E. coli BL21染色体上含有T7 RNA 聚合酶基因,该基因受lacUV5启动子控制;而该启动子受IPTG诱导。

 


查询多克隆位点请浏览http://www.iba-biotagnology.com/naps/naps_fr01_02.html

载体序列可从www.iba-bioTAGnology.com/download.html 下载

 

用于在大肠杆菌中表达的载体

 


Strep-tagÒ 载体概览:

  IBA提供多种用于在大肠杆菌中表达的pASK-IBA载体以便携带有Strep-tag的重组蛋白表达。除了抗生素抗性基因(AmpR, CamR),pASK-IBA载体仅在XbaI和HindIII限制性酶切位点之间有区别。其区别如下图所示:您可以在N-或C-端标签之间、细胞质外周表达或细胞质表达之间和/或用以去除标签的内蛋白酶切割位点(Factor Xa, enterokinase, thrombin 和 TEV protease)之间作选择。请注意,通常无须去除标签。

 


双标签和6xHistidine-tag载体概览:

  除了Strep-tagÒ 载体,IBA还提供带有Strep-tag和6xHistidine-tag的双标签载体以及6xHistidine-tag载体。一个蛋白质上的两个不同标签能产生最高的纯化因素,使得可以在变性或生理条件下纯化全长蛋白质。而且,直接从培养基开始的纯化操作可以被优化。

  载体仅在XbaI和HindIII限制性酶切位点之间有区别。

 


哺乳动物表达载体

 

  IBA的pEXPR-IBA载体是专为哺乳动物细胞中高水平表达和纯化重组Strep-tagÒ和/或 6xHistidine-tag融合蛋白而设计的。这些载体的克隆策略相同,因而与相应的细菌pASK-IBA质粒相兼容。因此,一个PCR片段可以被平行克隆进pASK-IBA及其相等的pEXPR-IBA。人巨细胞病毒(CMV)立早启动子在很多哺乳动物细胞中提供强表达。为了延长在转染细胞中表达的时间,载体会在潜伏感染了SV40大T-抗原(如COS7)的细胞系中复制。此外,新霉素抗性基因可以允许直接筛选稳定的细胞系。

 


pEXPR-IBA 特点

益处

Strep-tag II

采用Strep-Tactin基质纯化重组蛋白

CMV 立早启动子/增强子

在多种哺乳动物细胞中高水平表达

多克隆位点

插入目标基因并与Strep-tag和/或6xHistidine-tag融合。与pASK-IBA载体兼容

新霉素抗性基因

在哺乳动物细胞中筛选稳定的转染子

氨卞青霉素抗性基因

E. coli中筛选

pUC复制起始位点

E. coli中高拷贝复制

BM40 (仅见于pEXPR-IBA42 和44 )

使蛋白质分泌进培养基中

Factor Xa, thrombin (thb), enterokinase (ent) ,TEV protease (TEV)切割位点

如果需要可以除去Strep-tag(一般不需要)


 


用于在酵母中表达的载体

 

  IBA现供应两种带有Strep-tagÒ和瑞士Dualsystems Biotech AG(www.dualsystmes.com)的HA epitope-tag的酵母载体。

 

特点:

l 高水平、可诱导的表达

l 无需加入用于诱导的试剂或改变培养基

l 诱导受紧密调控使表达毒性蛋白质

 

载体pKS1-ST和pKS2-ST组合了蛋白质表达的两个重要特点:

 

l 可诱导的ADH2启动子:ADH2启动子受培养基中葡萄糖缺失的诱导。在早期生长过程中,葡萄糖充裕,启动子无活性,因此防止对酵母生长的负效应。当细胞到达静止早期时,葡萄糖被培养基耗尽,ADH2启动子被诱导,产生大量蛋白质。

l KanMX表达框:不象其他酵母表达载体,pKS-ST载体特有一个KanMX表达框,使得可以在丰富培养基中以G418筛选。丰富培养基如YPD的使用将显著增强细胞密度和蛋白质产量。




比较所有Strep-tagÒ, 6´Histidine-tag及double-tag载体

 

质粒

Strep-tag

6xHis

-tag

HA

epitope-tag

分泌

Tag去除

蛋白酶

抗性

目录号

大肠杆菌载体:具有tet启动子用于胞质外周表达
pASK-IBA2

C-端

-

-

Yes

No

-

Amp

2-1301-000

pASK-IBA4

N-端

-

-

Yes

No

-

Amp

2-1303-000

pASK-IBA6

N-端

-

-

Yes

Yes

factor Xa

Amp

2-1305-000

pASK-IBA12

N-端

-

-

Yes

Yes

thrombin

Amp

2-1311-000

pASK-IBA14

N-端

-

-

Yes

Yes

enterokinase

Amp

2-1313-000

pASK-IBA32

-

C-端

-

Yes

No

-

Amp

2-1332-000

pASK-IBA44

N-端

C-端

-

Yes

No

-

Amp

2-1344-000

大肠杆菌载体:具有tet启动子用于细胞质表达
pASK-IBA3plus

C-端

-

-

No

No

-

Amp

2-1402-000

pASK-IBA5plus

N-端

-

-

No

No

-

Amp

2-1404-000

pASK-IBA7plus

N-端

-

-

No

Yes

factor Xa

Amp

2-1406-000

pASK-IBA13plus

N-端

-

-

No

Yes

thrombin

Amp

2-1412-000

pASK-IBA15plus

N-端

-

-

No

Yes

enterokinase

Amp

2-1414-000

pASK-IBA17plus

N-端

-

-

No

Yes

TEV protease

Amp

2-1416-000

pASK-IBA33plus

-

C-端

-

No

No

-

Amp

2-1433-000

pASK-IBA35plus

-

N-端

-

No

No

-

Amp

2-1435-000

pASK-IBA37plus

-

N-端

-

No

Yes

factor Xa

Amp

2-1437-000

pASK-IBA43plus

C-端

N-端

-

No

No

-

Amp

2-1443-000

pASK-IBA45plus

N-端

C-端

-

No

No

-

Amp

2-1445-000

pASK-IBA63a-plus

C-端

-

-

No

No

-

Amp

2-1463-100

pASK-IBA63b-plus

C-端

-

-

No

No

-

Amp

2-1463-200

pASK-IBA63c-plus

C-端

-

-

No

No

-

Amp

2-1463-300

pASK-IBA65b-plus

N-端

-

-

No

No

-

Amp

2-1465-200

大肠杆菌载体:具有tet启动子和氯霉素抗性(CAT)

pASK-IBA2C

C-端

-

-

Yes

No

-

CAT

2-1321-000

pASK-IBA3C

C-端

-

-

No

No

-

CAT

2-1322-000

pASK-IBA4C

N-端

-

-

Yes

No

-

CAT

2-1323-000

pASK-IBA5C

N-端

-

-

No

No

-

CAT

2-1324-000

pASK-IBA6C

N-端

-

-

Yes

Yes

factor Xa

CAT

2-1325-000

pASK-IBA7C

N-端

-

-

No

Yes

factor Xa

CAT

2-1326-000

大肠杆菌载体:具有T7启动子
pPR-IBA1

C-端

-

-

No

No

-

Amp

2-1390-000

pPR-IBA2

N-端

-

-

No

No

-

Amp

2-1391-000

哺乳动物载体:具有人CMV启动子

pEXPR-IBA3

C-端

 

-

No

No

-

Amp/Neo

2-1903-000
pEXPR-IBA5

N-端

 

-

No

No,

-

Amp/Neo

2-1905-000

pE, XPR,, , ,, -I, B, A7<, /DIV>

N-端

 

-

No

Yes

factor Xa

Amp/Neo

2-1907-000

pEXPR-IBA13

N-端

 

-

No

Yes

thrombin

Amp/Neo

2-1913-000

pEXPR-IBA15

N-端

 

-

No

Yes

enterokinase

Amp/Neo

2-1915-000

pEXPR-IBA17

N-端

 

-

No

Yes

TEV protease

Amp/Neo

2-1917-000

pEXPR-IBA42

C-端

N-端

-

Yes

No

-

Amp/Neo

2-1942-000

pEXPR-IBA43

C-端

N-端

-

No

No

-

Amp/Neo

2-1943-000

pEXPR-IBA44

N-端

C-端

-

Yes

No

-

Amp/Neo

2-1944-000

pEXPR-IBA45

N-端

C-端

-

No

No

-

Amp/Neo

2-1945-000

酵母载体:具有ADH2启动子
pKS1-ST

N-端

-

N-端

No

No

-

Amp/G418

2-3801-000

pKS2-ST

N-端

-

N-端

Yes

No

-

Amp/G418

2-3802-000

每个载体的规格:5g

 

产品

规格

目录号

测序引物

pASK-IBA载体:上游测序引物

1nmol, 10pmol/ul, HPLC纯化

5-0000-101

pASK-IBA载体:下游测序引物

1nmol, 10pmol/ul, HPLC纯化

5-0000-102

pASK-IBA载体:上、下游测序引物

1nmol each, 10pmol/ul, HPLC纯化

5-0000-104

pPR-IBA载体:上游测序引物

1nmol, 10pmol/ul, HPLC纯化

5-0000-111

pPR-IBA载体:下游测序引物

1nmol, 10pmol/ul, HPLC纯化

5-0000-112

pPR-IBA载体:上、下游测序引物

1nmol each, 10pmol/ul, HPLC纯化

5-0000-114

pEXPR-IBA载体:上游测序引物

1nmol, 10pmol/ul, HPLC纯化

5-0000-121

pEXPR-IBA载体:下游测序引物

1nmol, 10pmol/ul, HPLC纯化

5-0000-122

pEXPR-IBA载体:上、下游测序引物

1nmol each, 10pmol/ul, HPLC纯化

5-0000-124




 


 公司网站:www.iba-lifesciences.com/



 



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